Články a aktuality 2012 - 2018

Ověření pravdivosti metod LDH, AST, AMY a ALP dodávaných firmou Abbott ⁽²⁾

 

Pravdivost metody LDH (kat.č. 2P56) AST (kat.č. 8L91), AMY (kat.č. 7D58), ALP (kat.č. 7D55) byla ověřena měřením vychýlení (bias). Jelikož firma Abbott používá pro kalibraci enzymatických metod konstantní kalibrační faktor (Kf), byla nejdříve na certifikovaném materiálu ověřena pravdivost metody pomocí materiálu s uvedenou certifikovanou hodnotou dle referenční metody IFCC.

O naměřenou pravdivost lze upravit kalibrační faktor metody, aby bylo dosaženo lepší shody s výsledkem referenční metody dle IFCC.

Chce-li laboratoř dosáhnout lepší návaznosti výše uvedených metod na referenční metody, je potřeba upravit výrobcem doporučený kalibrační faktor na nový (Kf ^IFCC). Faktor lze podle níže uvedených hodnot biasu upravit v laboratoři nejjednodušeji připočtením (v případě záporné hodnoty bias odečtením) k 100%, získanou hodnotou vydělit 100 a výsledkem vynásobit používaný příslušný kalibrační faktor. Upravený faktor doporučuji ověřit certifikovaným materiálem.

 

Kf ^IFCC = Kf * (100+bias(%)) / 100

 

Tabulka 1: Naměřený bias s referenčními metodami pro uvedené enzymatické metody ⁽²⁾

 

 

enzym	bias (%)
LDH	-7,2
AST	2,5
AMY	-8,3
ALP	-8,4

 

 

LDH nové generace pro Abbott ARCHITECT cSystems

 

Laktát dehydrogenáza je enzym přítomný v buňkách různých tkání například srdce, jater, ledvin, kosterního svalstva. Je zapojen do buněčného energetického procesu buňky tím, že katalyzuje oxidaci laktátu na pyruvát. Pro jeho široký výskyt v organizmu se jedná o nespecifický marker pro několik diagnóz.

Měření aktivity tohoto enzymu se používá například:

• při diferenciální diagnostice hemolytické anemie
• jako tumorový marker u některých zhoubných onemocnění (např. hematologické malignity)
• u svalových onemocnění
• a zvýšena je i u celé řady dalších onemocnění (srdeční nebo plicní infarkt, plicní embolie, onemocnění jater, nefrotický syndrom)

Zaváděním nových specifičtějších stanovení pro jednotlivé diagnózy se význam měření aktivity LDH snižuje. Přesto se jedná o stále žádané vyšetření.
Rozeznáváme pět izoenzymů, které jsou orgánově specifičtější, ale při stanovení aktivity enzymu nelze jejich koncentraci odlišit (k jejich rozlišení používáme elektroforézu).
Referenční metoda IFCC na stanovení aktivity LDH je postavena na oxidaci laktátu na pyruvát za současné redukce NAD na NADH (pH reakce je upraveno pufrem: N-methyl-D-glukamin - MEG).
Firma Abbott uvedla v loňském roce na trh novou diagnostickou metodu pro stanovení aktivity LDH v séru a plazmě. Diagnostická souprava má zvýšenou stabilitu a malou interferenci s bilirubinem a triglyceridy (interference s hemoglobinem se neuvádí vzhledem k vysoké aktivitě LDH v erytrocytech, která brání zpracování hemolytických vzorků).
Jednotky pro vyjádření aktivity LDH vzhledem k převzatým údajům jsou souhrnně použity U/l (pro získání údajů v doporučených jednotkách µkat/l je potřeba uvedené hodnoty vydělit 60).

 

Obrázek 1: Interference s bilirubinem ⁽¹⁾
Vliv koncentrace bilirubinu na změnu aktivity LDH v %.

 

 

 

Obrázek 2: Interference s triglyceridy ⁽¹⁾
Vliv koncentrace triglyceridů (použit Intralipid 20%) na změnu aktivity LDH v %.

 

 

 

 

 

Obrázek 3: Variační koeficienty ⁽¹⁾
Nová diagnostická souprava byla testována na kontrolních materiálech Lyphocheck Assayed Chemistry Control firmy Bio-Rad. Vzorky byly měřeny duplicitně 2x denně po dobu 7 dnů. Pro koncentraci 157 U/l byla naměřen variační koeficient CV=1,88%, pro hodnotu 379 U/l byl stanoven variační koeficient CV=1,32%.

 

 

 

 

 

Obrázek 4: Linearita metody ⁽¹⁾
Kontrola linearity metody byla provedena pomocí měření vzorků v tripletu po 10% ředících krocích v rozsahu 225 – 1942 U/l.

 

 

 

 

Použitá literatura:

 

1. Comparison of a New IFCC Traceable Automated LDH Method on Abbott ARCHITECT to Current Routine Method Using Plasma and Serum as Sample Source (J. Lotz, K. Pick, R. Schweigert, K. Lackner, Y. Lemma)
2. Traceability of ARCHITECT Enzyme Assays to IFCC Reference Method (Rosler, E.; Yahalom, D.; Lennartz, L.; Armbruster, D.; Orth, M.)

 

 

 

Analytika